TRPM8通道介导的自噬调节可能通过JNK信号通路影响肾癌细胞的存活

作者：付婷; 熊毅^*

来源：东南大学学报(医学版), 2020, 39(03): 348-353.

• 瞬时受体电位M8
• 自噬
• JNK信号通路
• 肾癌细胞
• 增殖
• 凋亡

目的:探讨瞬时受体电位M8(TRPM8)与肾癌细胞增殖及凋亡的关系。方法:qRT-PCR检测肾癌细胞(A498、GRC-1、786-0)中TRPM8的表达水平。利用shRNA转染A498细胞来构建TRPM8低表达的稳定细胞株,qRT-PCR和Western blotting验证shRNA的干扰效率。细胞集落形成实验检测沉默TRPM8后A498细胞的增殖能力;流式细胞术检测沉默TRPM8后A498细胞的凋亡能力;自噬检测试剂盒检测沉默TRPM8后A498细胞的自噬通量的变化;Western blotting检测沉默TRPM8后自噬相关标志物(ATG3、ATG5、ATG6、ATG7和ATG12)的变化和c-Jun N末端激酶(JNK)通路相关蛋白的表达。结果:TRPM8在肾癌细胞中高表达;转染TRPM8 shRNA后,TRPM8的表达明显降低(P<0.01);沉默TRPM8后,A498细胞的增殖能力明显下降(P<0.01),凋亡率明显增高(P<0.01);转染TRPM8 shRNA,A498细胞的自噬通量也明显减少(P<0.05),且ATG3、ATG5、ATG6、ATG7和ATG12蛋白的表达也下降(均P<0.05);沉默TRPM8后,JNK的磷酸化水平降低(P<0.05);使用JNK抑制剂(SP600125)后,ATG5和ATG7蛋白水平明显降低(均P<0.05)。结论:沉默TRPM8通道介导的自噬调节通过JNK信号通路可抑制肾癌细胞的增殖,促进其凋亡。

• 单位
  十堰市人民医院; 湖北医药学院