摘要
目的:通过动物实验观察沉默高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)表达对人肾癌细胞ACHN成瘤的影响。方法:通过慢病毒转染技术,培养HMGA2沉默的ACHN细胞。实验分三组:空白组、阴性对照组、HMGA2-siRNA组,建立裸鼠移植瘤模型,取瘤称重,比较各组的成瘤体积、质量和成瘤时间。用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、 N-钙黏蛋白(N-cadherin)和转录因子(Snail)的mRNA及蛋白表达。结果:成功构建特异性沉默HMGA2表达的肾癌细胞株,选择HMGA2-siRNA2进行后续试验。与空白组和阴性对照组相比,HMGA2-siRNA组成瘤体积和质量明显降低,成瘤时间显著延长,差异具有统计学意义(P<0.001)。RNA干扰沉默HMGA2表达后,E-cadherin的mRNA和蛋白表达均增高,N-cadherin和Snail的mRNA及蛋白表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:HMGA2-siRNA能够特异性沉默ACHN细胞中的HMGA2基因,并且HMGA2能够促进ACHN细胞的EMT,进而推动肾癌的发生发展。
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单位大连大学附属中山医院; 亳州市人民医院