基于核酸适配体-质粒DNA复合物信号放大的荧光免疫传感技术

作者：朱静; 黄勇; 蒋小平; 谭钟扬; 蒋健晖; 沈国励; 俞汝勤

来源：Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2009, 37(11): 1596-1600.

• 核酸适配体
• 血小板衍生增长因子
• 核酸适配体-质粒脱氧核糖核酸复合物
• 免疫传感

提出了一种简便、高灵敏的荧光免疫传感新技术,通过抗体/抗原/核酸适配体-质粒DNA复合物的特异性识别与双链质粒DNA与荧光染料SYBR GreenⅠ的嵌合作用,实现对血小板衍生增长因子BB(PDGF-BB)的检测。生物识别反应在微孔板中进行,PDGF-BB抗原与微孔板底部预包被的PDGF-BB抗体免疫反应后,加入核酸适配体-质粒DNA复合物与抗原形成夹心复合物。加入DNA双链嵌合染料SYBR GreenⅠ与夹心复合物的双链DNA部分结合可产生强荧光,其荧光强度可用于定量测定PDGF-BB浓度。实验考察了离子浓度、核酸适配体的延伸引物片段与质粒PUC19的反应比例、染料SYBR GreenⅠ浓度等分析条件对荧光信号的影响。在优化反应条件下,PDGF-BB检测的线性范围为0.2～200μg/L,检出限为0.1μg/L,并且实现了对人血清中PDGF-BB的定量检测。

• 单位
  湖南大学; 化学化工学院; 化学生物传感与计量学国家重点实验室