人脐带间充质干细胞的原代培养、鉴定及成骨分化的实验研究

作者：李云鹏; 赵昕; 封兴华; 张浚睿; 陆斌; 王一波; 刘彦普; 侯锐

来源：口腔医学研究, 2014, 30(08): 709-712.

DOI：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2014.08.004

• 间充质干细胞
• 脐带
• 细胞培养
• 成骨分化

目的:研究人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)的成骨分化及其在成骨诱导过程中成骨相关标记物的变化情况。方法:通过原代培养的方法获得hUCMSCs;通过流式细胞技术对获得的细胞进行鉴定;通过茜素红染色和细胞免疫荧光技术对成骨诱导后的细胞进行鉴定;在成骨诱导过程中设立时间点(0d、7d、14d、21d),对成骨相关标记物(碱性磷酸酶、骨桥蛋白、Runx2)进行检测。结果:通过原代培养成功获得hUCMSCs;流式分析结果显示其表达间充质干细胞标记物;进行成骨诱导21d后茜素红染色阳性,免疫荧光染色检测胞浆内大量表达骨桥蛋白;碱性磷酸酶活性和骨桥蛋白(mRNA水平)在第7天时即表现出具有统计学差异的升高,Runx2(mRNA水平)在第7天时达到峰值,随后下降。结论:hUCMSCs的成骨分化过程是一个连续的过程;体外诱导7d后成骨分化进行已经全面启动;经过诱导的hUCMSCs比未诱导的细胞更适合用于骨缺损修复。

• 单位
  军事口腔医学国家重点实验室; 第四军医大学; 西京医院