口蹄疫病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

作者：胡晓亮; 姜骞; 仇铮; 郭东春; 刘家森; 林欢; 刘培新; 田进; 李志杰; 刘大飞; 刘春国; 曲娟娟; 曲连东

来源：中国预防兽医学报, 2014, 36(12): 948-951.

• 口蹄疫病毒
• TaqMan探针
• 荧光定量PCR

为建立检测口蹄疫病毒(FMDV)的方法,本研究根据Gen Bank中FMDV的2B基因序列,设计合成一对引物和一条Taq Man探针,将2B基因克隆到p Blue Script SK(-)载体中,利用T7体外转录试剂盒制备标准品,通过优化反应条件,建立了Taq Man荧光定量PCR检测方法。结果表明,该检测方法的敏感性达到102拷贝/μL;与其它主要相关病毒均不发生交叉反应,批内和批间试验重复性的变异系数(CV)均小于3%。本研究建立的FMDV Taq Man荧光定量PCR方法对FMDV的快速检测具有重要意义。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 东北农业大学; 生命科学学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所