牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR检测方法的建立

作者：孔玉方; 王慧煜; 袁向芬; 景志忠; 韩雪清^*

来源：中国兽医科学, 2022, 52(04): 439-443.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0060

• 牛结节性皮肤病病毒
• 荧光定量PCR
• 检测方法

根据牛结节性皮肤病病毒（LSDV）的保守基因序列设计了特异性的引物和探针，建立了荧光定量PCR检测方法。对该方法的特异性、敏感性和重复性进行了试验，并用田间临床样品对该方法和OIE推荐的普通PCR进行了验证。结果显示，本研究建立的荧光定量PCR与绵羊痘病毒（SPPV）、山羊痘病毒（GTPV）、牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）和羊口疮病毒（ORFV）均无交叉反应；重组质粒标准品的检测限为1.16×100copies/μL；组间和组内的变异系数均≤2.00%。25份田间临床样品检测结果显示，本研究建立的荧光定量PCR阳性检出率为100%，而OIE推荐的普通PCR方法的阳性检出率为55.6%。上述结果表明，本研究建立的LSDV荧光PCR特异性强、敏感性高、重复性好，为牛结节性皮肤病的监测和防控提供了有效的技术手段。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院; 中国农业科学院兰州兽医研究所