谷胱甘肽-S-转移酶人趋化因子CCL3L1的表达

作者：徐斌; 石英; 李俊红; 张薇; 吴昊; 陈德喜

来源：中国医学科学院学报, 2006, 28(05): 642-646.

• 趋化因子
• CCL3L1
• 融合蛋白
• 谷胱甘肽-S-转移酶

目的克隆人趋化因子CCL3L1基因,表达并初步纯化谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-CCL3L1融合蛋白。方法从乳腺癌细胞MCF7中提取总RNA,采用RT-PCR扩增CCL3L1cDNA基因,克隆入GST融合表达载体pGEX-4T-1中,重组载体经酶切和测序鉴定后,在BL21大肠杆菌中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,获得GST-CCL3L1融合蛋白,采用SDS-PAGE和Westernblotting分析表达产物。结果经测序、酶切鉴定证明CCL3L1基因已正确插入到pGEX-4T-1中,经IPTG诱导后,表达出相对分子质量为34000的新生GST-CCL3L1融合蛋白。结论GST-CCL3L1融合蛋白可被成功表达。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院