摘要
目的 探讨下肢骨折患者miR-342-5P表达对其成骨细胞分化、增殖、迁移的影响及其作用机制。方法 选取我院2019年1月至2020年12月下肢骨折患者35例,使用Percoll密度梯度离心法获取骨髓间充质干细胞样本并培养,诱导其成骨细胞分化,分别进行miR-342-5P转染、miR-342-5P沉默处理,并取无干预细胞作为对照(NC组),观察不同处理下样本细胞活力、分化、增殖、迁移相关因子表达;确认结果后进一步建立miR-342-5P转染+si-Bmp7组,观察不同处理下成骨细胞分化、增殖、迁移相关蛋白表达及MEK/ERK通路表达。结果 过表达组细胞凋亡率、成骨细胞细胞活力显著高于NC组及沉默组(P<0.05),过表达miR-342-5p的细胞中PCNA、CyclinA、CyclinE1、CDK2、CyclinD1、CDK4的水平明显降低,miR-342-5p沉默细胞水平均升高(P<0.05);过表达miR-342-5p细胞相对迁移率、ALP蛋白、RUNX2 mRNA及Ocn m RNA、Bmp7 mRNA水平显着低于NC组(P<0.05),miR-342-5p沉默细胞相对迁移显着高于NC组(P<0.05);miR-342-5p沉默组ALP蛋白、RUNX2 mRNA及Ocn mRNA、Bmp7 mRNA水平显著高于NC组(P<0.05);miR-342-5p inhibitor+si-Bmp7组细胞相对迁移率、PCNA、CyclinA、CyclinE1、CDK2、CyclinD1、CDK4、RUNX2、Ocn蛋白水平低于miR-342-5p沉默组(P<0.05),细胞凋亡率显著高于miR-342-5p沉默组(P<0.05),miR-342-5p沉默后p-MEK和p-ERK的表达均升高(P<0.05),敲除Bmp-7后,升高被消除。结论 miR-342-5p可通过下调Bmp7表达抑制下肢骨折患者成骨细胞增殖、迁移和分化;MEK/ERK通路参与了miR-342-5p的调控机制,miR-342-5p的独特作用可能为下肢骨折愈合提供新的治疗靶点。
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单位晋城市第二人民医院