豌豆成分的Taq Man实时荧光PCR检测方法的建立

作者：白景莲; 赵娜; 顾晗潇; 万超; 陈溪; 杨爱馥^*

来源：中国口岸科学技术, 2023, 5(09): 70-75.

• 豌豆
• Lectin基因
• Taq Man实时荧光PCR
• 真实性鉴别

本研究建立了一种能够快速检测食品中豌豆成分的Taq Man实时荧光PCR方法。以豌豆（Pisum sativum）植物凝集素Lectin基因为靶基因设计特异性引物和探针，建立豌豆成分Taq Man实时荧光PCR检测方法，并进行物种特异性分析、灵敏度分析以及实际应用检测。结果显示：建立的Taq Man实时荧光PCR检测方法特异性强，仅对豌豆基因组DNA出现特异性扩增曲线，供试的其他30种非目标源性对照样品基因组DNA扩增结果均为阴性；对豌豆成分的检出限可达到其含量的0.1%（质量分数）。应用该方法对160份市售样品进行检测，其中含豌豆成分的样品检测结果为阳性并与DNA条形码标准方法检测结果一致，不含豌豆源性成分的样品均未出现扩增曲线，检测结果均与商品标识一致。该方法灵敏度高，特异性强，可快速高效地进行豌豆成分的真实性甄别。