发卡样NF-κB特异性RNA干扰表达载体的构建及体外效应研究

作者：王明海; 王锋超; 陆建华; 麦跃; 刘晓宏; 程天民; 粟永萍

来源：第三军医大学学报, 2004, (08): 655-657.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.08.001

• NF-κB
• RNA干扰
• ECV304
• LPS NF κB
• RNA interference
• ECV 304
• LPS

目的　采用RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)技术 ,通过构建人NF κBp65基因的特异性siRNA真核表达载体 ,体外观察对NF κB基因的沉默作用 ,以及对内毒素 (LPS)刺激后NF κB活性的调控作用。方法　采用基因克隆技术 ,将合成的发卡样特异性p65RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体 (pPUR U6) ,构建p65siRNA的表达载体 ,转染体外ECV 3 0 4细胞 ,48h后观测胞内NF κBp65亚单位蛋白水平 (Westernblotting)、及对LPS ( 10 μg ml)刺激后NF κB活化的抑制作用。结果　①成功构建发卡样p65siR...

• 单位
  创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 第三军医大学