摘要
目的探讨miRNA-497过表达对人结肠癌细胞放疗敏感性的影响。方法将体外培养的人结肠癌细胞株Caco2分为空白对照组(未转染)、阴性对照组(转染阴性对照)和miRNA-497转染组(转染miRNA-497过表达的慢病毒载体),经0、2、4、6、8 Gy照射处理后,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miRNA-497的表达情况,噻唑蓝(MTT)实验和平板克隆实验检测miRNA-497过表达对Caco2细胞放疗敏感性的影响,蛋白质印迹法(Western blot)检测胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)和AKT、磷酸化AKT(p-AKT)的表达水平。结果 miRNA-497转染组的miRNA-497表达水平为(6.45±0.62),高于阴性对照组的(1.18±0.25)和空白对照组的(1.00±0.08),差异均有统计学意义(P<0.05)。照射剂量为2、4、6、8 Gy时,miRNA-497转染组细胞的克隆形成率均低于空白对照组(P<0.05);照射剂量为2、4、6、8 Gy时,miRNA-497转染组细胞的存活率均低于空白对照组(P<0.05);照射剂量为4、6、8 Gy时,miRNA-497转染组细胞的增殖抑制率均明显高于空白对照组(P<0.01)。4 Gy/min剂量率垂直辐射Caco2细胞24、48、72 h后,miRNA-497转染组的细胞存活率均低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,miRNA-497转染组的IGF-1R和p-AKT蛋白表达水平均低于空白对照组(P<0.05)。结论过表达miRNA-497可以增加Caco2细胞的放疗敏感性,并且该敏感性增加可能是通过靶向抑制PI3K/AKT信号通路实现。
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单位郑州人民医院; 郑州大学第一附属医院