实时荧光PCR熔解曲线法快速鉴定嗜肺军团菌

作者：戈立秀; 赵利伟; 陈文聪; 朱庆义; 吴尚为

来源：临床检验杂志, 2012, (03): 187-189.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2012.03.002

• 嗜肺军团菌
• 实时荧光PCR熔解曲线
• 猝灭FRET探针 Legionella pneumophila
• real-time PCR melt curve
• quenching FRET probe

目的建立特异、快速、敏感的实时荧光PCR熔解曲线基因分型方法,并探讨该法在鉴定嗜肺军团菌中的应用价值。方法根据嗜肺军团菌16S rRNA基因保守序列设计引物和猝灭FRET探针建立实时荧光PCR熔解曲线方法,优化引物与探针浓度,用15株嗜肺军团菌、30株非嗜肺军团菌及7株其他病原菌标准菌株验证该方法的特异性、敏感性和重复性,用该法检测117例临床痰标本并进行基因测序。结果 15株不同血清型的嗜肺军团菌Tm值均为57℃;7株非嗜肺军团菌Tm值为43℃,1株Tm值为45℃;其余22株非嗜肺军团菌和7株其他病原菌均无明显Tm值。该方法最低检出限可达0.1 pg/μL。检测117例痰标本发现3株嗜肺军团...

• 单位
  天津医科大学; 广州金域医学检验中心有限公司