冲击波对糖尿病慢性创面微环境下HaCat细胞增殖及迁移的影响

作者：康靖汶; 盛炜; 瓮长水; 李美蓉; 罗芸; 张丽^*

来源：解放军医学院学报, 2022, 43(12): 1253-1305.

• 冲击波
• 创面愈合
• 表皮细胞
• CCK-8法
• 划痕试验

背景体外冲击波疗法可促进糖尿病慢性创面愈合，其机制有待深入研究。目的 观察不同剂量冲击波干预对糖尿病慢性创面微环境中HaCat细胞增殖和迁移能力的影响，尝试从细胞水平揭示体外冲击波疗法促进糖尿病慢性创面愈合的作用机制。方法 以人表皮角质形成细胞(HaCat细胞)为研究对象，分为对照组、糖尿病慢性创面模型(chronic diabetic wound,CDW)组以及不同剂量冲击波(shock wave, SW)干预组(SW1组：0.05 mJ/mm2,500脉冲；SW2组：0.10 mJ/mm2,500脉冲；SW3组：0.10 mJ/mm2,1 000脉冲)，通过高糖低氧孵育条件建立糖尿病慢性创面细胞模型，采用倒置显微镜观察细胞形态学改变，CCK-8法检测细胞增殖能力，细胞划痕试验检测细胞迁移能力，观察不同能流密度和脉冲输出的冲击波对糖尿病慢性创面微环境中HaCat细胞增殖和迁移能力的影响。结果 与对照组比较，冲击波干预后HaCat细胞形态未见明显改变。CCK-8实验显示，HaCat细胞增殖活性呈现“先增加、后下降”的趋势，其OD450值：Day6>Day4>Day8>Day2>Day1,Day2及其后各时点与Day1比较差异有统计学意义(P均<0.01)。各组HaCat细胞增殖活性：SW2组>SW1组>SW3组>对照组>CDW组(以Day6为例)(P均<0.05)。倒置相差显微镜观察显示，各组HaCat细胞划痕愈合率均随时间延长逐渐增加，划痕愈合率：SW2组>SW1组>SW3组>对照组>CDW组(P均<0.05)。结论 离体条件下，冲击波可促进糖尿病慢性创面微环境中功能受损的HaCat细胞的增殖和迁移能力；0.10 mJ/mm2、500脉冲的冲击波干预剂量对HaCat细胞的促增殖效应更为明显。

• 单位
  解放军总医院