鮰爱德华菌T6SS eivpP基因缺失突变株的构建

作者：郭羿; 杨晓宇; 倪萍; 王一婷; 郭思聪; 马红丽; 赵小然; 叶仕根^*

来源：大连海洋大学学报, 2019, 34(01): 27-32.

DOI：10.16535/j.cnki.dlhyxb.2019.01.005

• 鮰爱德华菌
• eivpP基因
• 基因敲除
• 缺失突变

为研究鮰爱德华菌Edwardsiella ictaluriⅥ型分泌系统(T6SS)EivpP与其他分泌蛋白之间的相互作用及其在细菌致病过程中的作用机制,在克隆到eivpP基因上、下游同源臂的基础上,采用融合PCR技术制备了eivpP基因缺失用的融合片段,并成功克隆到自杀质粒pDM4内,再将重组自杀质粒转化到大肠杆菌S17-1λ(pir)中,与鮰爱德华菌野生菌株ATCC33202共培养。经同源重组和蔗糖负筛获得鮰爱德华菌eivpP基因缺失突变阳性克隆,经PCR鉴定结果显示,突变株未检测出eivpP基因,即eivpP基因彻底敲除成功。本试验结果可为研究eivpP基因在鮰爱德华菌致病过程中的作用机制提供数据资料,为鮰爱德华菌弱毒疫苗的研发提供理论依据。

• 单位
  大连海洋大学