蛋白激酶C参与内源性大麻素花生四烯乙醇胺对L型钙电流的抑制作用

作者：郝桂敏; 崔娜; 李学慧; 李茜

来源：河北医药, 2014, 36(22): 3365-3369.

• 内源性大麻素
• 内源性大麻素受体
• 花生四烯乙醇胺
• 蛋白激酶C
• L型钙电流

目的研究内源性大麻素物质花生四烯乙醇胺是否通过改变蛋白激酶C(PKC)活性从而抑制心肌L型钙电流,并进一步探讨可能改变PKC活性的信号途径。方法应用全细胞膜片钳技术记录单个心肌细胞的L型钙电流(P<0.05);应用PepTag非放射性蛋白激酶C检测系统(Promega)检测PKC活性;Elisa试剂盒测定细胞中二脂酰甘油(DAG)的含量;western blot技术测定磷脂酶Cβ(PLCβ)和磷酸化磷脂酶Cβ(p-PLCβ)表达。结果应用花生四烯乙醇胺灌流心肌细胞后显著抑制心肌L型钙电流(P<0.05),预先应用大麻素1型受体(CB1)阻断剂AM251或PKC非特异性激动剂佛波醇酯(PMA)可以完全阻断此抑制效应,而大麻素2型受体(CB2)阻断剂AM630没有阻断花生四烯乙醇胺抑制L型钙电流的作用。检测心肌细胞PKC活性发现,花生四烯乙醇胺明显抑制PKC活性(P<0.05),同样预先应用AM251或PMA完全阻断花生四烯乙醇胺对PKC活性的抑制效应,而AM630无此效应。应用花生四烯乙醇胺没有影响心肌细胞DAG含量和PLCβ的磷酸化。结论本实验首次证明内源性大麻素花生四烯乙醇胺激活心肌细胞CB1受体后抑制细胞PKC的活性,从而抑制L型钙电流,此过程没有PLCβ-DAG途径参与。

• 单位
  河北医科大学; 河北医科大学第二医院; 河北医科大学第一医院