胞内分枝杆菌ELISA检测方法的建立及初步应用

作者：王康; 葛淑敏; 宋力强; 张家宁; 饶继红

来源：现代预防医学, 2019, 46(09): 1668-1683.

• 胞内分枝杆菌
• 酶联免疫法
• 检测

目的建立胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测胞内分枝杆菌生物学新方法。方法以自主制备的胞内分枝杆菌HBHA单克隆抗体为包被抗体,建立胞内分枝杆菌ELISA检测方法。应用棋盘法优化检测条件,同时试验对封闭液进行了最佳选择,对检测样品的特异性、敏感性和准确度进行评估。结果确定抗体包被最佳浓度为4μg/ml,抗鼠血清最佳稀释浓度为1:400,同时选择P/N值为3.38的1%BSA作为最佳封闭剂。双抗夹心法对新金分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、浅黄分枝杆菌和卡介苗等抗原检测的P/N值均小于2.1,无交叉反应。当菌体浓度为200个/ml时,检测结果仍为阳性,应用该方法检测60份样品中,呈现阳性的菌株为56份,检测准确度高达93.3%。结论本方法可作为胞内分枝杆菌快速检测和流行病学调查的工具,同时对畜牧业的健康发展提供一种新的技术保障。

• 单位
  长春理工大学; 生命科学技术学院