miR-497阻断Wnt/β-catenin信号通路抑制SGC-7901人胃癌失巢凋亡抵抗细胞的生长和转移

作者：禹莉; 许颖; 杨靖瑞; 高榴; 李海翔; 王姿涵; 张兆君; 凌云志^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2023, 39(07): 617-625.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009624

• miR-497
• SGC-7901细胞
• Wnt
• β联蛋白(β-catenin)
• 失巢凋亡抵抗

目的 探讨微小RNA 497(miR-497)在胃癌转移中的作用及机制。方法 SGC-7901胃癌亲本细胞培养在超低黏附环境中，重新贴壁后建立SGC-7901细胞失巢凋亡抵抗模型，集落形成实验、流式细胞术、 TranswellTM实验和划痕愈合实验检测其细胞生物学行为与亲本细胞的差异、荧光定量PCR检测miR-497表达、 Western blot法检测无翅基因/β联蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白如波形蛋白(vimentin)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)等表达的变化；亲本细胞和凋亡抵抗SGC-7901细胞转染miR-497抑制物(miR-497 inhibitor)或miR-497模拟物(miR-497 mimic), CCK-8法检测其增殖活性、 TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力、 TranswellTM迁移实验和划痕愈合实验检测细胞迁移能力、 Western blot法检测Wnt1、 β-catenin、 E-cadherin、 vimentin蛋白表达的变化。通过在失巢凋亡抵抗SGC-7901细胞中转染miR-497 mimic,在裸鼠皮下接种，测量并记录肿瘤组织的体积及质量的变化，Western blot法检测Wnt1、 β-catenin、 E-cadherin、 vimentin蛋白表达的变化。结果 与亲本细胞相比，SGC-7901胃癌失巢凋亡抵抗细胞增殖速度更快、集落形成更强，凋亡率更低，侵袭和迁移能力更强，miR-497表达明显下降。下调miR-497后细胞增殖能力显著增强，侵袭、迁移能力明显增强，Wnt1、 β-catenin蛋白表达量显著增加，vimentin表达显著增加，E-cadherin表达下降，而上调miR-497表达结果相反。miR-497过表达组的肿瘤组织生长速度、肿瘤的体积与质量明显低于对照组；Wnt1、 β-catenin、 vimentin蛋白表达量显著下降，而E-cadherin表达明显上调。结论miR-497在SGC-7901失巢凋亡抵抗细胞中低表达，miR-497通过阻断Wnt/β-catenin信号通路的活化和EMT,抑制胃癌细胞的生长和转移。

• 单位
  蚌埠医学院; 蚌埠医学院第一附属医院