熔解曲线分析法用于RHD 1227G>A基因分型的实验研究

作者：王霓; 周世航^*; 邵林楠; 于卫建; 张开立; 刘铭^*

来源：中国输血杂志, 2018, 31(09): 953-956.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2018.09.009

• 实时PCR
• 熔解曲线分析
• el" name="keyword">Del
• RHD基因
• RHD 1227A等位基因
• 基因分型

目的建立用于RHD 1227G>A基因分型的熔解曲线分析法。方法设计合成RHD 1227G>A等位基因特异性引物和公共引物,并在2条等位基因特异性引物5’端加上不同长度的GC序列。在实时PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,对RHD 1227G>A基因分型。将建立的熔解曲线分析法与常规的PCRSSP法比较。对于2种方法检测结果不符的标本,进行RHD基因第9外显子测序,确定该标本为RHD 1227G>A基因型。结果应用熔解曲线分析法对84例标本进行基因分型,其中RHD 1227A+/G-32例,1227A-/G+22例,1227A+/G+6例,1227A-/G-24例。发现2例标本熔解曲线法检测的基因型为1227A+/G-,而PCR-SSP法检测结果为1227A+/G+。经基因测序证实这2例标本结果是1227A+/G-。结论用于RHD 1227G>A基因分型的熔解曲线法具有操作简单、快速、准确等优点,优于常规的PCR-SSP法。

• 单位
  大连医科大学; 大连市血液中心