胶质射脉革菌(Phlebia tremellosa)单核菌株的制备与单核体筛选

作者：郭洋; 贾晨波; 张彦雄; 苏建宇; 徐春燕^*

来源：基因组学与应用生物学, 2021, 40(02): 656-662.

DOI：10.13417/j.gab.040.000656

• 胶质射脉革菌(Phlebia tremellosa)
• 原生质体
• 单核体
• 杂合度

为获得胶质射脉革菌(Phlebia tremellosa) BBEL0901的单核体,本研究首先考察了溶壁酶的浓度、菌龄、酶解时间、稳渗剂浓度等因素对原生质体产量的影响,进而采用正交试验优化影响原生质体制备的关键条件,最后基于细胞核染色的方法鉴定单核菌株,基于ITS序列对单核体进行分子鉴定后采用二代测序技术对单核体的全基因组DNA进行检测。结果表明:采用马铃薯葡萄糖(PDB)加富培养基中静置培养4.5 d的菌丝,以0.65 mol/L氯化钠为稳渗剂,用5%的溶壁酶酶解3 h的原生质体产量最大;通过荧光染色和显微镜观察获得了三株单核菌株,对单核菌株M73的全基因组测序显示胶质射脉革菌的基因组为36.1 Mb,杂合度较低。本研究为胶质射脉革菌全基因组测序及基因功能的验证提供了可靠的实验材料。

• 单位
  宁夏大学; 生命科学学院