二甲双胍对非酒精性脂肪肝小鼠的内质网应激相关凋亡基因的调控

作者：肖清华; 饶紫兰; 雷俊宝; 叶毅敏; 房太勇^*

来源：中国临床药理学杂志, 2019, 35(03): 245-248.

DOI：10.13699/j.cnki.1001-6821.2019.03.015

• 非酒精性脂肪性肝病
• 内质网应激
• 肝细胞凋亡
• 二甲双胍

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠使用二甲双胍干预后CHOP、Caspase12通路相关基因的表达变化,探讨二甲双胍影响NAFLD的可能机制。方法将C57BL/6J雄性8周小鼠30只分为对照组、模型组和实验组,每组10只。对照组小鼠常规饲料喂养;模型组和实验组小鼠均给予高脂饮食喂养,喂养8周。脂肪肝模型建立成功后,实验组给予二甲双胍150mg·kg-1·d-1,灌胃干预4周;对照组和模型组均予等体积生理盐水灌胃处理。末次用药后禁食12 h,麻醉状态下,称取小鼠体重、肝重、双侧附睾周围脂肪组织,并计算脂肪指数;心脏采血检测血清谷丙转氨酶(ALT)、三酰甘油(TG);肝组织分别用于组织病理切片、液氮速冻后转-80℃保存待测肝组织中GRP78、IRE-1α、CHOP、Caspase12、Bcl-2、Bim等基因与蛋白表达水平;以TUNEL法测肝细胞凋亡情况。结果与对照组相比,模型组小鼠体重及脂肪重量、脂肪指数均升高,差异均有统计学意义;与模型组相比,实验组小鼠体重、脂肪重量及脂肪指数明显著下降。与对照组相比,模型组小鼠AL、TG明显升高,差异有统计学意义;与模型组比较,实验组血清ALT、TG明显下降,差异有统计学意义。与对照组比较,模型组肝组织可见明显肝脂肪变性;与模型组相比,实验组小鼠肝脂肪变程度有减轻。与对照组相比,模型组小鼠肝组织中GRP78、IRE-1α、CHOP、Caspase12、Bim mRNA及蛋白表达增加,而Bcl-2基因表达下降,差异均有统计学意义;与模型组相比,实验组肝组织中GRP78、IRE-1α、CHOP、Caspase12、Bim mRNA及蛋白表达下降,而Bcl-2基因表达上升,差异均有统计学意义。对照组可见少量凋亡细胞,凋亡指数为30. 63±5. 25;模型组凋亡细胞明显增多,凋亡指数为58. 32±4. 16;实验组仅见少量凋亡细胞,凋亡指数为20. 26±5. 41。模型组凋亡指数与对照组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论二甲双胍可改善内质网应激,可能通过CHOP/Caspase12凋亡信号通路,上调Bcl-2、下调Bim表达,从而减轻肝细胞凋亡,达到治疗脂肪肝作用。

• 单位
  福建医科大学附属第二医院