NDV诱导HeLa细胞发生核糖体应激及对翻译起始复合体的影响

作者：陈琳琳; 兰金苹; 武彩霞; 王静; 贾朝霞; 曹旭; 刘开扬^*

来源：微生物学报, 2022, 62(09): 3576-3586.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20220047

• 新城疫病毒
• 核糖体
• 应激
• 宫颈癌

【目的】研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV) HBUN/LSRC/F3株(以下简称NDV F3)诱导宫颈癌细胞(He La)发生核糖体应激后对e IF2α介导的翻译起始复合体e IF4F的调控作用。【方法】流式细胞术及CCK-8检测细胞凋亡；实时荧光定量PCR (quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测c-Myc基因表达；流式细胞术分析细胞周期；Western blotting技术检测c-Myc、RPS7、Bcl-2、NP、e IF4E及e IF2α蛋白的表达；Western blotting和免疫荧光染色技术检测NP、e IF4E蛋白定位。【结果】与阴性对照组相比，NDV F3抑制He La细胞增殖并诱导细胞凋亡。细胞周期中G0/G1期出现停滞，c-Myc表达呈时间依赖性抑制，c-Myc与Bcl-2蛋白表达量在0–48 h内逐渐下降，NP蛋白在24 h时生成并逐渐增加，RPS7、e IF4E和e IF2α蛋白含量在0–48 h内呈先增加后降低趋势。Western blotting定位分析及激光共聚焦显微镜结果显示NP蛋白主要存在细胞质中，NP与e IF4E存在共定位现象。【结论】NDV F3诱导He La细胞凋亡并引发核糖体应激反应，NP与e IF4E相互作用而抑制e IF2α介导的翻译起始复合体e IF4F形成，阻断其与宿主m RNA之间的联系，同时促进NDV F3 m RNA的翻译，最终造成宿主蛋白翻译抑制。

• 单位
  河北北方学院