自身免疫性肝炎患者外周血淋巴细胞全长cDNA文库的构建

作者：度尧; 谢德胜; 陈云天^*

来源：贵州医药, 2018, 42(11): 1289-1409.

• 自身免疫性肝炎
• cDNA文库
• 基因

目的成功构建自身免疫性肝炎患者外周血淋巴细胞cDNA文库,同时进行文库的鉴定。方法分离自身免疫性肝炎患者外周血淋巴细胞并提取总RNA,利用SMART技术构建全长cDNA文库并进行文库质量的鉴定,最后扩增文库并随机挑取10个噬菌斑鉴定插入片段大小。结果构建的cDNA文库滴度为3.4×108 pfu/mL,重组率>97%,文库经过扩增后滴度达6.6×1011pfu/mL,插入片段长度在0.5～2.0kb之间,平均长度为1.25kb。结论本文构建的自身免疫性肝炎患者外周血淋巴细胞cDNA文库符合建库要求,为进一步筛选、克隆其发病相关基因、探索发病机制奠定基础。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院; 上海市第五人民医院; 复旦大学