摘要

目的建立生精细胞体外分化(如减数分裂、精子变态)培养体系,为研究精子发生中各种调控因素的作用提供一个良好的细胞模型。方法取20~22日龄的SD雄性大鼠睾丸,放在预冷的Hanks液中洗2次,用1 mg/mL胶原酶32℃消化15~20 min。然后将睾丸剪碎,重复用1 mg/mL胶原酶消化5~10 min。细胞用含10%胎牛血清及各种营养因子的HamF12/DMEM培养液悬浮,按约2×106/cm2密度分别接种于双室培养槽(双室培养)或放有盖玻片的6孔板(单室培养)中,在32℃、95%空气、5%CO2条件下培养。每日在相差显微镜下观察共培养支持细胞/生精细胞的生长状态,定期进行苏木精-伊红染色、B...

  • 单位
    华中科技大学同济医学院