1株猫嵌杯病毒的分离鉴定及全基因序列分析

作者：陈昌毅; 李根; 何红玲; 陈昱彤; 黄学喆; 罗均; 郭霄峰^*

来源：中国畜牧兽医, 2023, 50(09): 3707-3718.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.09.027

• 猫嵌杯病毒(FCV)
• 分离鉴定
• 基因测序
• 遗传进化分析

【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus, FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中，以RT-PCR筛选含有FCV的病料，利用F81细胞及病毒空斑纯化试验对其进行纯化和扩繁。电镜下观察纯净化分离病毒的形态。通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)测定病毒的半数组织培养感染剂量(median tissue culture infectious dose, TCID50)及不同收毒时间的病毒滴度，绘制分离病毒的一步生长曲线。对分离病毒全基因序列进行核苷酸序列测定，并对其遗传进化及相似性进行分析。【结果】从疑似患猫的粪便病料中分离获得1株FCV,经空斑纯化后，该毒株会导致F81细胞发生皱缩、变圆、葡萄串样聚集和脱落等细胞病变效应。在电镜下病毒粒子呈圆形、直径35～39 nm、无囊膜。IFA结果显示，分离病毒可与兔源FCV VP1-F蛋白特异性多克隆抗体发生结合，在荧光显微镜下可见明显特异性荧光，病毒滴度为1×109 TCID50/mL。分离病毒基因组全长为7 722 bp,与FCV-SH毒株核苷酸相似性最高，为83.94%,属于同一分支。VP1基因与FCV-SH1902毒株核苷酸相似性最高，为81.32%,与FCV-SH1901毒株氨基酸相似性最高，为89.99%。【结论】本研究成功分离到1株FCV,并对其全基因序列进行分析。该研究为FCV致病机理及疫苗研究奠定了基础。

• 单位
  华南农业大学