狂犬病毒M蛋白多克隆抗体的制备与鉴定

作者：黎强; 丁祎; 刘高文; 贾亭; 高媛媛; 陈芮; 宋玉竹; 韩芹芹; 夏雪山; 张金阳^*

来源：昆明理工大学学报(自然科学版), 2022, 47(04): 90-117.

DOI：10.16112/j.cnki.53-1223/n.2022.04.252

• 狂犬病病毒(RABV)
• M蛋白
• 原核表达
• 多克隆抗体

为了获得狂犬病病毒(RABV)M蛋白，并制备其对应的多克隆抗体.运用分子克隆技术构建pET-28a-CVS-M原核表达重组载体，并将其转化到E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞以进行诱导表达.将表达纯化的RABV M重组蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体，随后多克隆抗体的效价、特异性以及应用范围通过ELISA和IFA这些实验来检测.结果表明，构建的原核表达重组质粒成功表达了预期的重组蛋白，大小约28 kDa,且能与His-tag多抗血清发生特异性反应.制备的多克隆抗体能够特异性地识别原核M蛋白以及其天然抗原表位，并且其效价高达1∶204 800.本研究成功制备了RABV M融合蛋白和较好特异性的RABV M蛋白多克隆抗体，为RABV感染致病机制研究及建立快速、高效免疫学检测技术提供技术指导和材料.

• 单位
  昆明理工大学