唾液特异性mRNA荧光复合检测体系的构建

作者：赵一霞; 郝文静; 李文; 杨栋辉; 胡胜; 邓锴; 季安全; 孙启凡^*

来源：中国法医学杂志, 2021, 36(01): 41-46.

DOI：10.13618/j.issn.1001-5728.2021.01.009

• 法医物证学
• 体液斑迹鉴定
• mRNA分析
• 多重PCR复合检测体系
• 唾液

目的基于唾液中特异表达的mRNA标记分子,建立五重荧光复合检测系统,实现对唾液的有效鉴定。方法采集健康志愿者唾液样本,提取样本总RNA,利用终点逆转录-聚合酶链反应(Endpoint Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, Endpoint RT-PCR)技术扩增3个唾液特异mRNA标记分子MUC7、HTN3、STATH和2个管家基因GAPDH、ACTB,通过毛细管电泳分离检测特异性产物,构建起五重mRNA荧光复合检测体系。同时使用100份样本和6份室温晾干1M、6M的唾液斑样本对体系的特异性、重复性和灵敏度进行验证。结果在40份唾液样本中均检测到唾液mRNA标记分子MUC7、HTN3、STATH以及管家基因GAPDH、ACTB共5个特异性的峰,而在外周血、月经血、精液和阴道分泌物样本中仅检测到管家基因GAPDH、ACTB,检测灵敏度可达2ng总RNA,且在室温晾干1M、6M的唾液斑样本中仍能检测到唾液特异性标记分子。结论本研究建立五重m RNA荧光复合扩增检测系统可以有效的将唾液与其他4种法医学常见的体液区分。

• 单位
  公安部物证鉴定中心; 湖北医药学院