C端带Flag标签重组小鼠IL-33慢病毒载体的构建及鉴定

作者:高二可; 张路; 徐旺旺; 金齐力
来源:牡丹江医学院学报, 2023, 44(03): 18-20+26.
DOI:10.13799/j.cnki.mdjyxyxb.2023.03.001

摘要

目的 构建C端携带Flag标签蛋白的重组小鼠IL-33慢病毒表达载体,为进一步研究IL-33在肿瘤免疫中的作用提供实验基础。方法 设计引物在小鼠IL-33基因的C端加入Flag标签,PCR法扩增带有标签的目的基因,再接入经酶切后的线性化pLVX-puro慢病毒载体。带标签的目的基因重组载体用两种限制性内切酶ApaI和XhoI酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳鉴定,最后测定目的基因序列。结果 成功构建重组小鼠IL-33慢病毒表达载体并将Flag标签成功插入到目的基因的C端。结论 成功构建了重组慢病毒表达载体pLVX-mIL-33-Flag,为下一步在肿瘤中研究IL-33的作用和机制奠定了基础。

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