缝隙连接蛋白43在淫羊藿苷成骨诱导中的作用研究

作者：张山锋; 马中希; 叶志伟; 刘珍星; 杨钟华; 孙志博^*

来源：中国矫形外科杂志, 2018, 26(15): 1418-1422.

• 成骨分化
• 淫羊藿苷
• 1-庚醇
• 缝隙连接蛋白43

[目的]探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在淫羊藿苷(ICN)诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化中的作用。[方法]密度梯度离心法体外分离培养MSCs,取第三代细胞实验,流式细胞仪测定细胞表面标记物。实验分四组:(1)空白对照组,(2)成骨诱导组,(3)1-庚醇组,(4)ICN组。MTT检测不同时间点2.5μmol/L 1-庚醇的细胞毒作用。分别用含0、10-9mol/L ICN、10-9mol/L ICN+2.5μmol/L 1-庚醇的成骨诱导液(ODM)诱导培养14 d后,实时定量PCR检测各组成骨相关基因及Cx43的表达情况,Western blot检测MSCs成骨分化过程中Cx43蛋白的表达情况,碱性磷酸酶(ALP)定量测定各组细胞ALP含量。[结果]细胞高表达CD13、CD44,低表达CD14、CD45。2.5μmol/L 1-庚醇对细胞没有明显的毒性抑制作用。ICN诱导14 d后I型胶原、ALP、骨钙素(OCN)、RUNX2及Cx43的表达显著增加。2.5μmol/L 1-庚醇干预后I型胶原、ALP、RUNX2及OCN表达明显减弱,但仍高于空白对照组及成骨诱导组,其中Cx43的表达无明显变化。ALP定量分析结果显示ICN能促进ALP合成与分泌,其含量显著高于其他三组,但ICN的成骨诱导作用部分被1-庚醇所阻断。[结论]Cx43介导的缝隙链接细胞间通讯在ICN诱导成骨过程中起着很重要作用。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属普爱医院