摘要

目的 探讨牛磺酸通过调控miR-126对高糖诱导的大鼠内皮细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 体外培养的大鼠胸主动脉内皮细胞,分为NC组(葡萄糖浓度5.5 mmol·L-1)、HG组(葡萄糖浓度为30.0 mmol·L-1)、HG+低浓度牛磺酸组(葡萄糖浓度为30.0 mmol·L-1,牛磺酸浓度为5.0μmol·L-1)、HG+中浓度牛磺酸组(葡萄糖浓度为30.0 mmol·L-1,牛磺酸浓度为10.0μmol·L-1)和HG+高浓度牛磺酸组(葡萄糖浓度为30.0 mmol·L-1,牛磺酸浓度为20.0μmol·L-1)。将模拟物(miR-126 mimics)及其阴性对照(miR-NC)、miR-126抑制物(anti-miR-126)及其阴性对照(anti-miR-NC)分别转染至大鼠胸主动脉内皮细胞。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-126表达水平。蛋白质印迹(Western blot)检测细胞裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3前体(Pro-caspase3)蛋白表达。结果 与NC组比较,HG组大鼠胸主动脉内皮细胞活性显著降低(P<0.05);与HG组比较,HG+低浓度牛磺酸组、HG+中浓度牛磺酸组、HG+高浓度牛磺酸组大鼠胸主动脉内皮细胞活性显著升高(P<0.05)。与NC组比较,HG组大鼠胸主动脉内皮细胞凋亡率、Cleavedcaspase3蛋白表达显著上升,Pro-caspase3蛋白表达显著降低(P<0.05);与HG组比较,HG+低浓度牛磺酸组、HG+中浓度牛磺酸组、HG+高浓度牛磺酸组大鼠胸主动脉内皮细胞凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达显著降低,Pro-caspase3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与NC组比较,HG组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著降低(P<0.05);与HG组比较,HG+低浓度牛磺酸组、HG+中浓度牛磺酸组、HG+高浓度牛磺酸组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著升高(P<0.05)。与HG+miR-NC组比较,HG+miR-126组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著升高,细胞活性、Pro-caspase3蛋白表达显著升高(P<0.05);凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达显著降低(P<0.05)。与HG+牛磺酸组和HG+牛磺酸+anti-miR-NC组比较,HG+牛磺酸+anti-miR-126组大鼠胸主动脉内皮细胞中miR-126表达显著降低,细胞活性、Pro-caspase3蛋白表达显著降低,凋亡率、Cleaved-caspase3蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 牛磺酸通过上调miR-126促进高糖诱导的大鼠内皮细胞凋亡,为治疗糖尿病提供了理论依据。

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