摘要
目的 研究连翘提取物(FSE)对脂多糖(LPS)诱导炎症的抑制作用,以及LPS诱导的RAW264.7细胞极化模型建立。方法 MTT法检测FSE和LPS对RAW264.7细胞的毒性作用;倒置显微镜检测不同浓度的FSE对LPS刺激后的细胞形态变化,酶标仪检测细胞上清液的一氧化氮(NO)生成量;荧光显微镜检测细胞内活性氧(ROS)和细胞凋亡的荧光强度;Real-time PCR法检测巨噬细胞中iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、Arginase-1和CD206 mRNA的表达水平。结果 MTT结果发现FSE在50μg/mL浓度时无细胞毒性,LPS作用36 h时,不同浓度FSE对LPS刺激的细胞形态变化和NO生成有抑制作用,同时FSE可以抑制LPS刺激后活性氧(ROS)的减少和细胞的凋亡,Real-time PCR结果显示,用不同浓度(100、250、500、750 ng/mL)LPS处理细胞24 h,或者用500 ng/mL浓度的LPS处理细胞不同时间后,RAW264.7细胞M1型标记基因(TNF-α、IL-1β、iNOS、IL-6)mRNA的表达水平明显升高,RAW264.7细胞M2型标记基因(IL-10、Arginase-1、CD206)mRNA的表达水平明显降低;FSE可降低LPS诱导的M1型标记基因mRNA的表达水平,升高M2型标记基因mRNA的表达水平。结论 FSE可通过抑制RAW264.7细胞凋亡和促进RAW264.7细胞的极化来抑制LPS诱导的炎症反应。
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单位神经内科; 中国农业科学院农产品加工研究所; 西南医科大学; 重庆医科大学附属第一医院