胱天蛋白酶募集域蛋白9在大鼠急性胰腺炎相关肺损伤中的作用及其机制

作者：田军; 徐萍^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(01): 35-40.

• 核转录因子-κB
• p38丝裂原活化蛋白激酶
• 胰腺炎
• 肺损伤

目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)在大鼠急性胰腺炎相关性肺损伤(APALI)中的作用及机制。方法 30只雄性Sprague Dawley大鼠采用随机数字表法分成对照组(6只)、APALI组(12只)、腺病毒干扰组(12只)。通过胰管注射牛磺胆酸钠建立重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型, 造模后3、6 h处死动物。苏木精-伊红(HE)染色评估胰腺组织及肺组织的病理改变。采用时聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中CARD9、p65核因子-κB(p65NF-κB)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的转录水平。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)水平。蛋白质印迹法(Western blot)检测肺组织中CARD9、p-p65NF-κB、p-p38MAPK蛋白表达水平。组间数据比较采用单因素方差分析, 最小显著性差异法(LSD)法或Tamhane’s T2法进行两两比较。结果 APALI组3、6 h肺组织中CARD9 mRNA水平均高于Control组[3 h(5.572±0.722)、6 h(12.588±2.008)比(0.991±0.066), F=134.738, t=15.475、14.139, P值均<0.05], 差异均有统计学意义;腺病毒干扰组3、6 h CARD9 mRNA水平均低于APALI组相同时间点[3 h(3.079±0.348)比(5.572±0.722)、6 h(7.945±1.538)比(12.588±2.008), F=55.899, t3 h=7.618、t6 h=4.497, P值均<0.05], 差异均有统计学意义。造模后3、6 h, APALI组肺组织中NF-κB mRNA、p38MAPK mRNA水平均高于对照组[NF-κB 3 h(6.746±0.894)、6 h(15.116±1.939)比(0.973±0.076), p38MAPK 3 h(4.422±0.369)、6 h(6.405±0.590)比(0.973±0.536), tNF-κB=15.766、17.849, tp38MAPK=22.686、22.469, P值均<0.05], 差异均有统计学意义;造模后3、6 h, 腺病毒干扰组的NF-κB mRNA、p38MAPK mRNA水平分别低于APALI组同时间点[NF-κB 3 h(4.002±0.543)比(6.746±0.894)、6 h(8.771±0.805)比(15.116±1.939), p38MAPK 3 h(2.705±0.232)比(4.422±0.369)、6 h(5.372±0.401)比(6.405±0.590), tNF-κB=6.430、7.401, tp38MAPK=9.969、3.351, P值均<0.05], 差异均有统计学意义。结论 APALI大鼠肺组织中存在CARD9相关的NF-κB、p38MAPK信号通路, 可通过抑制CARD9表达、减轻炎性反应对APALI发挥保护作用。

• 单位
  上海市松江区中心医院