进出口动物中新霉素ELISA检测方法的建立

作者：孙明君; 邱芳; 张金玲; 郑小龙

来源：中国畜牧兽医, 2016, 43(12): 3163-3169.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2016.12.012

• 进出口食用动物
• 新霉素
• 酶联免疫吸附试验
• 检测方法

应用碳二亚胺法合成人工抗原得到卵清蛋白偶联新霉素,通过方阵试验确定最佳抗原包被浓度与抗体稀释倍数,以新霉素质量浓度对数为横坐标、抗体抑制率为纵坐标绘制标准曲线,建立了进出口食用动物中新霉素ELISA快速检测技术,并对建立的方法进行了回收率和特异性试验。结果表明,建立的检测方法包被人工合成抗原的最适稀释度为1∶200,抗体的最佳稀释度为1∶2 000,半数抑制浓度(IC50)为6.99ng/mL;该方法的最低检测限达40ng/mL,与庆大霉素、卡那霉素、链霉素、托普霉素、阿米卡星、双氢链霉素的交叉反应率均小于0.1%,平均加标回收率83.77%。标准曲线在1.540ng/mL范围内是线性的,相关系数为0.987,标准曲线方程为y=-37.66x+94.592;与常规液相检测方法相比操作简单、快速。本研究建立了一种快速、高效、特异的新霉素ELISA检测方法。

• 单位
  中华人民共和国山东出入境检验检疫局