基于TLR4-MyD88依赖通路白喉乌头单体Ⅰ抑制树突状细胞成熟的作用机制

作者：王怡杨; 贾贝田; 曹敏; 刘海朝; 金昱彤; 韩露; 罗莉; 丛珊; 边育红^*

来源：现代中西医结合杂志, 2022, 31(20): 2775-2780.

• 白喉乌头单体I
• TLR4-MyD88依赖通路
• 树突状细胞
• 脂多糖

目的 研究白喉乌头单体I(Delvestidine)抑制脂多糖(LPS)诱导的小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)成熟的分子机制，进一步评价白喉乌头的药效。方法 提取小鼠骨髓来源单核细胞，体外LPS诱导为BMDCs,设立正常组、LPS组、LPS+Delvestidine 20μg/mL组、LPS+Delvestidine 40μg/mL组、LPS+Delvestidine 80μg/mL组，流式细胞术检测各组BMDCs表面标记CD80、CD86表达情况，筛选Delvestidine最适浓度；设立正常组、LPS组、LPS+Delvestidine 80μg/mL组，ELISA法检测各组BMDCs上清液中细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)含量，qRT-PCR和Western blot法检测各组BMDCs中TLR4-MyD88依赖通路关键基因和蛋白的表达情况。结果 LPS组CD80+CD86+细胞比例明显高于正常组(P<0.05),LPS+Delvestidine各组CD80+ CD86+细胞比例均明显低于LPS组(P均<0.05),且LPS+Delvestidine 80μg/mL组明显低于LPS+Delvestidine 20μg/mL组和LPS+Delvestidine 40μg/mL组(P均<0.05),Delvestidine的最适给药浓度为80μg/mL。与正常组比较，LPS组IL-10含量明显降低(P<0.05),IL-6含量和TLR4-MyD88依赖通路中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6、Ikk2 mRNA和蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05);与LPS组比较，LPS+Delvestidine 80μg/mL组IL-10含量明显升高(P<0.05),IL-6含量和TLR4-MyD88依赖通路中TLR4、MyD88、IRAK4、TRAF6、Ikk2 mRNA和蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05)。结论 Delvestidine可抑制BMDCs的成熟及活化，其作用机制可能与TLR4-MyD88依赖通路有关。

• 单位
  新疆医科大学第一附属医院; 天津中医药大学