麦芽糖诱导软化芽孢杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶在枯草杆菌中的表达

作者：张佳瑜; 吴丹; 陈晟; 陈坚; 吴敬

来源：中国生物工程杂志, 2010, 30(12): 42-48.

DOI：10.13523/j.cb.20101208

• α-CGT酶
• 枯草杆菌
• 外源表达
• 响应面优化
• 发酵

通过PCR扩增软化芽孢杆菌α-环糊精葡萄糖基转移酶基因,将基因片段克隆到大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pGJ103中,转化枯草杆菌WB600得基因工程菌进行外源表达。在1.5%的麦芽糖初始发酵培养基上摇瓶培养,48 h后重组枯草杆菌产酶活性为6.1U/ml。通过单因素分析和响应面分析对重组枯草杆菌产CGT酶摇瓶发酵条件进行优化。分析得到培养基关键组分麦芽糖,玉米淀粉和酵母粉三者最佳浓度分别为:15.5g/L,13g/L和20g/L。在此条件下,摇瓶培养36h后α-CGT酶活性为17.6U/m l,5L罐分批发酵30h后酶活达到20U/ml(水解活性为1.4×104IU/ml)。

• 单位
  生物工程学院; 工业生物技术教育部重点实验室; 食品科学与技术国家重点实验室; 江南大学