摘要
目的:研究Tribble同源蛋白3(TRIB3)对新生大鼠海马神经元细胞缺氧缺血后细胞增殖和凋亡的影响,为TRIB3在新生儿缺氧缺血性脑损伤治疗方面提供初步的实验依据。方法:无血清法培养新生大鼠海马神经元细胞,氧糖剥夺(OGD)法体外模拟新生儿缺氧缺血性脑损伤细胞模型,Western blot和qRT-PCR检测OGD后海马神经元细胞中TRIB3蛋白和mRNA表达情况; TRIB3 siRNA或毒胡萝卜素(Tg)处理OGD海马神经元细胞并培养24 h,Western blot检测TRIB3的蛋白表达水平。采用MTT检测细胞存活率,Western blot检测凋亡相关基因(Bax、Caspase-3和Bcl-2)以及NF-κB的蛋白表达水平。结果:与正常对照组(Control)比较,OGD后海马神经元细胞TRIB3蛋白和mRNA表达水平显著升高(P <0. 05); TRIB3 siRNA显著降低TRIB3蛋白表达水平,并促进OGD后海马神经元细胞增殖; TRIB3 siRNA显著增加Bcl-2/Bax比值,而显著降低Caspase-3蛋白表达水平(P <0. 05); TRIB3低表达显著抑制NF-κB表达(P <0. 05);另外,Tg逆转TRIB3 siRNA对NF-κB蛋白表达的抑制作用。结论:TRIB3沉默促进缺氧缺血后海马神经元细胞增殖、抑制细胞凋亡,其机制与抑制NF-κB蛋白表达水平相关。
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