胃癌细胞中乳酸脱氢酶A表达变化及其对EMT的影响

作者：陈妍; 陈加华; 李小琴^*

来源：山东医药, 2019, 59(17): 20-23.

• 胃癌细胞
• 胃黏膜上皮细胞
• 乳酸脱氢酶A
• 波形蛋白
• 上皮性钙黏蛋白
• 细胞角蛋白
• 神经性钙黏蛋白
• 锌指转录因子
• β-连环蛋白
• 上皮间质转化

目的观察胃癌细胞中乳酸脱氢酶A(LDH-A)的表达变化,并探讨沉默LDH-A表达对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法体外培养胃癌细胞株OCUM-1和正常胃黏膜上皮细胞株RGM-1,采用qRT-PCR法检测细胞中LDH-A mRNA相对表达量,Western blotting法检测细胞中LDH-A蛋白表达情况。将OCUM-1细胞随机分为3组,LDH-A siRNA组采用Lipfoctamine2000脂质体转染试剂对细胞转染LDH-A siRNA序列,转染对照组转染siRNA无义对照序列,空白对照组只加入培养基。转染48 h后收集各组细胞,显微镜下观察胃癌细胞的形态学变化,采用Western blotting法检测细胞中上皮细胞特征蛋白上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)和间质细胞特征蛋白神经性钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录因子(Snail)、β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 OCUM-1细胞中LDH-A mRNA及蛋白表达高于RGM-1细胞(P均<0. 05)。LDH-A siRNA组LDH-A mRNA及蛋白表达低于转染对照组和空白对照组(P均<0. 05)。显微镜下可见LDH-A siRNA组细胞排列紧密,细胞黏附性增加,表现为上皮细胞特性。LDH-A siRNA组E-cadherin、Cytokeratin蛋白表达水平高于转染对照组和空白对照组,N-cadherin、Snail、β-catenin、Vimentin蛋白表达水平低于转染对照组和空白对照组(P均<0. 05)。结论胃癌细胞中LDH-A表达升高;沉默LDH-A表达可上调胃癌细胞上皮细胞特征蛋白表达、下调间质细胞特征蛋白表达,从而抑制胃癌细胞的EMT进程。

• 单位
  徐州医科大学; 沭阳仁慈医院; 江苏大学附属医院