摘要
【目的】筛选合适的抗生素浓度是植物基因工程的重要环节,研究多油辣木PKM-1愈伤组织诱导及分化植株阶段卡那霉素耐受性,确定相应阶段合适的筛选浓度,为开展辣木基因工程遗传改良奠定基础。【方法】设置5种卡那霉素浓度梯度,研究多油辣木无菌苗上胚轴、嫩叶以及由上胚轴诱导的愈伤组织,对不同卡那霉素浓度的响应。【结果】培养基中卡那霉素50 mg·L-1时,上胚轴细胞团膨大变缓,出愈率下降;70 mg·L-1时细胞团膨大明显受到抑制,上胚轴诱导愈伤组织阶段的耐受性范围为50~70 mg·L-1。培养基中卡那霉素30 mg·L-1时,嫩叶膨大变缓;50 mg·L-1时,嫩叶膨大完全受到抑制,基本不再形成愈伤组织,部分嫩叶褪绿变白,嫩叶诱导愈伤组织阶段的耐受性范围为30~50 mg·L-1。培养基中卡那霉素20 mg·L-1时愈伤组织分化增殖开始受到影响;30 mg·L-1时基本不增殖,愈伤组织分化植株的耐受性范围为20~30 mg·L-1。【结论】多油辣木PKM-1植株分化阶段对卡那霉素的敏感程度高于愈伤组织增殖阶段,nptII为筛选标记遗传转化多油辣木PKM-1,愈伤组织筛选阶段适宜的卡那霉素用量为50 mg·L-1,分化植株阶段可降低至30 mg·L-1,研究结果为采用卡那霉素筛选遗传转化辣木奠定了基础。
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