摘要

背景:为获得大量高纯度的内皮细胞,以便更好地开展对内皮细胞相关疾病的实验研究,此次研究通过改进消化酶配比比例,更新内皮细胞的分离、培养方法。目的:探索兔主动脉内皮细胞的体外培养方法,并对其进行鉴定,为更好地开展对内皮细胞相关疾病的实验研究奠定基础。方法:采用复合酶消化法,获取兔主动脉内皮组织及细胞悬液,经密度梯度离心后,获得纯度较高的血管内皮细胞,并进行体外培养。进一步对兔主动脉内皮细胞进行CD34免疫细胞化学染色鉴定,并进行细胞纯度分析。结果与结论:①体外培养出的血管内皮细胞在形态上呈典型的"铺路石"状排列;②此外免疫组化显示分离的细胞可强阳性表达CD34,证明其为内皮细胞;③对免疫组化照片进行定量分析,显示所有细胞均为CD34阳性细胞,即获得的内皮细胞纯度约大于95%;④提示采用复合酶消化法获取的兔主动脉内皮组织及细胞悬液,经密度梯度离心后,可获得纯度较高的血管内皮细胞,并通过体外培养的方法成功分离并培养了兔主动脉内皮细胞。