摘要
目的 探讨内皮前体细胞来源的微囊泡(endothelial progenitor cells-derived microvesicles,EPC-MVs)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的保护作用及机制。方法 培养大鼠内皮前体细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),使用超速离心法从EPCs培养液中提取微囊泡。选择健康7日龄新生SD大鼠60只,随机分为对照组、HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组,每组各15只。HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组制备HIBD模型,生理盐水组、EPC-MVs组分别在HIBD模型制备完成后予脑室内注射生理盐水、EPC-MVs,72 h后处死大鼠取脑组织,TTC染色检测脑组织梗死情况、实时荧光定量聚合酶链反应检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA、蛋白免疫印迹检测VEGF蛋白表达变化。结果 从12周龄SD大鼠脾脏提取及培养的细胞经形态学及流式细胞术检测确认为EPCs。EPCs培养上清中高速离心分离获得的EPC-MVs经透射电镜观察符合微囊泡的形态学特征。对照组未检测到梗死脑组织,HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组脑梗死体积比分别为(80.3±6.3)%、(77.9±8.9)%、(35.2±7.7)%,EPC-MVs组小于HIBD组和生理盐水组(P<0.001)。HIBD组、生理盐水组、EPC-MVs组脑组织VEGF mRNA及蛋白表达均高于对照组(P<0.001),EPC-MVs组高于HIBD组和生理盐水组(P<0.001),生理盐水组和HIBD组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 脑室内注射EPC-MVs可减轻新生大鼠HIBD的程度,其机制可能与上调VEGF表达相关。
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单位电子科技大学; 成都市妇女儿童中心医院