摘要
旨在建立一种能同时快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)和4型(PCV4)的双重PCR方法。参考GenBank中PCV2和PCV4基因组序列,分别在PCV2 Rep和PCV4 Cap基因高度保守区设计2对特异性引物,经双重PCR条件优化,建立同时快速检测PCV2/4的双重PCR方法。该方法能同时扩增出264 bp(PCV2)和391 bp(PCV4) 2条特异性片段,而对其他8种常见猪病原扩增均为阴性;PCV2/4的最低检测量分别为61.1,54.9拷贝/μL。应用该方法对河南及山西省内60份临床样品进行检测,检测结果表明PCV2的检出率为51.67%(31/60),PCV4的检出率为18.33%(11/60),混合感染检出率为16.67%(10/57),单一PCR及双重PCR检测结果符合率100%。本研究建立的双重PCR检测方法具有敏感性高、特异性强、重复性好等优点,适合对PCV2和PCV4鉴别诊断和检测。
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单位河南牧业经济学院; 医药学院; 河南农业大学