分泌型表达EDA-EmIMP1的重组枯草芽胞杆菌的构建及其免疫原性研究

作者：陈志; 丁可欣; 林霞琳; 李元凯; 黄志坚; 殷光文^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(02): 199-205.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0005

• 枯草芽胞杆菌
• 分泌型蛋白
• EDA佐剂
• EmIMP1
• 巨型艾美耳球虫

枯草芽胞杆菌有着异源蛋白表达系统,纤维连接蛋白外域A(EDA)是一种能够提高相关蛋白的抗原性的佐剂,为了增强巨型艾美耳球虫的免疫相关蛋白1(IMP1)的抗原性,笔者对枯草芽胞杆菌分泌表达载体作为EDA分子佐剂重组亚单位疫苗的递呈载体的功能进行了研究,构建质粒pHT43-EDA-EmIMP1和pHT43-EmIMP1,将获得的重组质粒转化到枯草芽胞杆菌感受态中。将该重组菌对鸡饲喂,进行免疫学试验并做免疫效果评价。结果显示,该重组枯草芽胞杆菌可以成功表达目的蛋白,蛋白大小为70 ku。ELISA检测EDA组的效价最高,其滴度在3 200左右;三免EDA组的IFN-γ浓度显著高于其他组(P<0.05);三免EDA组和EmIMP1组的IL-12/70浓度显著高于PBS组(P<0.05);CD4+T细胞群的检测显示,EDA组的CD4+T细胞群比例显著高于枯草芽胞杆菌组和PBS组(P<0.05);EDA组、枯草芽胞杆菌组和EmIMP1组的卵囊排出量都显著低于攻虫组(P<0.05);病变计分可以看出,EDA组对肠道保护效果显著优于除空白组外的其他组(P<0.05)。以上各项免疫学指标表明,枯草芽胞杆菌分泌型表达载体作为EmIMP1的抗原递呈载体可以有效提高免疫原性,其中EDA佐剂组的免疫效果最好。

• 单位
  动物科学学院; 福建农林大学