hMAM-A源性HLA-A2限制表位肽诱导CTL对乳腺癌细胞的杀伤作用

作者：胡园园; 刘佩佩; 王岩; 田昕; 孟凡东; 隋承光; 吴迪; 李妍; 张玲; 姜又红

来源：现代肿瘤医学, 2017, 25(18): 2890-2894.

DOI：10.3969/j.issn.1672-4992.2017.18.008

• 乳腺癌细胞
• 乳腺珠蛋白
• 表位肽
• 树突状细胞

目的:探讨h MAM-A源性HLA-A2限制性候选表位(KLLMVLMLAA)负载外周血树突状细胞(dendritic cells,DCs)诱导产生的细胞毒性杀伤细胞(CTL)对乳腺癌细胞的杀伤作用。方法:取HLA-A2+健康志愿者外周血,用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),体外用合成的肽段负载DC,不加肽的DC作为对照,采用流式细胞术测定DC的表型变化,ELISA测定IL-10、IL-12、IFN-γ分泌水平。CCK8法测定两种情况下DC诱导的自体CTL对(HLA-A2+/h MAM-A+)AU-565、(HLA-A2-/h MAM-A+)MDA-MB-415、(HLA-A2+/h MAM-A-)MCF-7乳腺癌细胞的杀伤效果。结果:成功培养出形态典型、功能成熟的DC,经肽负载的DC具有更典型的形态特征,DC表面标记分子(CD80、CD86、CD83、HLA-DR)较对照组稍高,上清中IL-12平均分泌水平较对照组高,IL-10平均分泌水平较对照组低,与T细胞共培养后IFN-γ分泌水平较对照组显著增高(P<0.05),对AU-565的杀伤效果显著优于MDA-MB-415、MCF-7乳腺癌细胞。结论:成功预测出h MAM-A源性HLA-A2+限制性CTL表位肽,其致敏的DC可有效呈递表位肽,诱导的CTL对乳腺癌细胞产生特异性杀伤。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院