基孔肯雅病毒nsP1单克隆抗体制备及其在快速检测中的应用

作者：周婷婷; 杨展; 常永和; 周东明; 朱进; 郑峰^*

来源：医学研究生学报, 2022, 35(02): 136-140.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2022.02.005

• 基孔肯雅病毒
• nsP1蛋白
• 单克隆抗体
• 胶体金

目的 基孔肯雅病毒(CHIKV)广泛分布于非洲、南亚以及东南亚地区。文章拟制备抗CHIKV nsP1蛋白单克隆抗体，建立CHIKV的现场快速检测方法。方法 合成nsP1编码基因序列，构建原核表达载体pET28a-nsP1,大肠埃希菌表达并纯化获得重组nsP1蛋白，免疫小鼠后用常规方法制备筛选可稳定分泌nsP1单克隆抗体的杂交瘤细胞株，SDS-PAGE和ELISA鉴定抗体特异性，并建立免疫学检测方法。结果 成功获得了6株阳性细胞株，纯化和筛选得到特异性良好的抗nsP1配对单克隆抗体，建立的双抗夹心ELISA法能特异性检测nsP1抗原，并在此基础上建立了可快速检测CHIKV的胶体金免疫层析方法。结论 成功建立了针对CHIKV抗原的免疫学检测方法，为CHIKV感染早期诊断增加了技术储备。