山羊痘病毒RPO30蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

作者：陈冬杰; 魏方; 林祥梅; 吴绍强^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(12): 1531-1536.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0200

• 山羊痘病毒
• RPO30蛋白
• 原核表达
• 单克隆抗体

为了研究山羊痘病毒RNA聚合酶亚基RPO30蛋白功能,构建了其原核表达质粒pET28a-RPO30和pGEX-6p-1-RPO30,并进行了诱导表达和纯化。将纯化的His-RPO30蛋白免疫BALB/c小鼠,并将免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,通过筛选得到了能够稳定分泌与RPO30蛋白特异性反应的单克隆抗体的杂交瘤细胞株7E5。对该单克隆抗体的轻链和重链类型进行测定,发现其重链为Ig G2b亚型,轻链为κ亚型。经测定,单克隆抗体7E5的腹水效价可达1∶128 000。RPO30单克隆抗体的制备将为该蛋白功能的研究提供有力工具。

• 单位
  中国检验检疫科学研究院