猪戊型肝炎病毒ORF2片段克隆及原核表达

作者：赵宇军; 朱远茂; 薛飞; 赵立平; 沈荣显; 相文华

来源：中国预防兽医学报, 2006, (03): 298-301.

• 猪
• 戊型肝炎病毒
• 表达 swine
• HEV
• expression

设计套式引物,内套引物含有BamHⅠ/XhoⅡ酶切位点,采用RT-PCR技术扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白基因ORF2部分片段,长度为634bp,将其克隆于PGEX-T载体,测序结果表明插入的片段属于戊型肝炎病毒ORF2部分,将该片段插入PproEXHTb表达载体,经酶切鉴定证实获得了重组表达质粒。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,经1mmol/LIPTG诱导,得到表达,表达蛋白分子量为27Ku,以包涵体形式存在。Westernblot分析表明,该蛋白可以与猪戊型肝炎阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的反应原性。

• 单位
  动物科技学院; 兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 山西农业大学