酶解改性对小麦醇溶蛋白致敏性的影响与工艺优化

作者:孟智鹏; 温青玉; 张雨; 李天齐; 张康逸*
来源:河南农业科学, 2022, 51(07): 163-172.
DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2022.07.017

摘要

小麦醇溶蛋白(GLI)是小麦中的主要过敏原,为降低其致敏性,研究酶法改性对 GLI 致敏性的影响,并对酶解工艺进行优化。首先,以致敏性特征值OD450为评价指标,筛选出碱性蛋白酶和复合蛋白酶进行同步酶解。然后以 OD450和水解度为指标进行单因素试验,并通过响应面试验优化酶解工艺,得到降低 GLI 致敏性的最佳酶解工艺:酶添加量为 3 080 U/g,底物质量浓度为 32 g/L,酶解温度为 50.5 ℃,酶解 pH 值为 7.48,酶解时间为 4 h。在此条件下,OD450由未处理的 1.013 2 降至 0.363 5。SDS-PAGE 和Tricine-SDS-PAGE 电泳分析显示,双酶酶解比单酶酶解有更高的酶解效率。ELISA 和 Western blot分析显示,酶法改性降低GLI致敏性的效果明显,且最优酶配方(双酶)比单酶降低致敏性的效果更佳。

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