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摘要
目的研究胶原蛋白1(colla-1)、转化生长因子β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX-4)在慢性束缚应激(CRS)模型小鼠食管中的表达水平,探讨心理应激诱导食管纤维化的发生及氧化应激所产生的影响。方法 20只雄性SPF级昆明小鼠随机分2组,即CRS组和对照组。CRS组小鼠每天在自制式束缚器中限制活动2 h,其余时间两组小鼠在相同环境中自由饮水摄食,实验持续14 d。通过Masson染色在电子显微镜下观察食管组织纤维化改变。采用免疫组化、实时定量RT-PCR、ELISA法检测NOX-4在小鼠食管中的表达,并通过实时定量RT-PCR法检测食管组织中纤维化因子colla-1、TGF-β1及α-SMA mRNA的表达量。结果与对照组小鼠相比,CRS组小鼠体重增加量低于对照组[(8. 75±1. 69) g vs (12. 69±3. 16) g],差异有统计学意义(t=3. 11,P <0. 05)。Masson染色镜下观察可见:CRS组小鼠食管黏膜上皮细胞间明显的纤维化表现,而对照组未见明显异常;免疫组化结果显示:NOX-4阳性着色细胞在大部分标本中均可见到,CRS组小鼠食管组织中阳性着色较对照组染色深且丰富; ELISA法检测结果表明,CRS组小鼠血清中NOX-4表达量明显高于对照组(1. 42±0. 05 vs 0. 49±0. 08),差异有统计学意义(t=-27. 32,P <0. 01)。实时定量RT-PCR实验结果表明,CRS组纤维化标志物(colla-1,TGF-β1,α-SMA)及NOX-4 mRNA表达水平是对照组的(2. 43±0. 36、2. 78±0. 13、2. 24±0. 18、2. 48±0. 40)倍,差异有统计学意义(t=-11. 19、-38. 86、-19. 90、-10. 37,P <0. 01)。结论 colla-1、TGF-β1、α-SMA参与心理应激诱导食管纤维化的形成,而氧化应激在食管纤维化产生中具有重要的作用。
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