金黄地鼠原代肝细胞的分离纯化与培养

作者：王瑶; 朱海波

来源：中国比较医学杂志, 2013, 23(05): 55-58+83.

• 金黄地鼠
• 原代肝细胞
• 两步胶原酶原位灌流法
• AMPK

目的建立一种简单、高效的金黄地鼠肝细胞分离、纯化及培养的方法。方法实验采用两步胶原酶原位灌流法分离地鼠原代肝细胞,percoll离心法纯化细胞,台盼蓝染色检测成活率,对所分离培养的原代肝细胞进行形态学鉴定,Western Blot检测细胞功能。结果经过分离纯化的金黄地鼠肝细胞,细胞成活率为(93.7%±2.1)%,细胞形态呈现不规则多边形,细胞多为双核和多核细胞。细胞在腺苷处理后,AMP激活的蛋白激酶(AMPK)磷酸化水平明显升高。结论成功建立了金黄地鼠肝细胞分离纯化及培养的方法。

• 单位
  药物研究所; 中国医学科学院北京协和医学院; 天然药物活性物质与功能国家重点实验室