摘要

目的研究Slit2及其受体Robo1在人宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞凋亡的影响和潜在机制。方法分别用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time PCR)和免疫印迹实验检测Slit2、Robo1、Bcl-2的mRNA和蛋白在20例正常宫颈上皮(NCE)、40例宫颈上皮内瘤变(CIN)、60例宫颈鳞癌(SCC)组织中的表达情况。在转染试剂Lipofectamine2000作用下,对He La细胞进行转染siRNA(沉默组)、质粒(过表达组)和单纯转染p CMV-HA质粒(p CMV-HA对照)及单纯转染无关siRNA序列的对照组(阴性对照),于特定时间后收集细胞用于后续实验。经Annexin V/PI染色后,用流式细胞术检测Robo1过表达和Slit2沉默后对细胞凋亡的影响;用免疫印迹法检测细胞凋亡指标PARP-1的剪切形式及Bcl-2的表达。结果 Slit2 mRNA在NCE、CIN、SCC中的相对表达水平分别为2. 48±0. 36,1. 78±0. 22,1. 45±0. 17,Robo1 mRNA分别为2. 69±0. 31,1. 94±0. 21,1. 48±0. 15,Bcl-2分别为1. 61±0. 21,2. 22±0. 23,2. 85±0. 28,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。过表达组和p CMV-HA对照组的Robo1相对表达水平分别为3. 48±0. 51,1. 00±0. 14,差异有统计学意义(P <0. 05)。过表达组早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡率分别为(7. 81±0. 80)%,(14. 22±1. 80)%和(23. 11±2. 02)%,p CMV-HA组早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡率分别为(2. 60±0. 82)%,(7. 33±0. 81)%和(9. 91±1. 72)%,差异有统计学意义(P <0. 05)。沉默组和阴性对照组Slit2分别为1. 00±0. 11,0. 51±0. 12,差异有统计学意义(P <0. 05);阴性对照细胞早期凋亡、晚期凋亡和总凋亡率分别为(4. 91±1. 12)%,(7. 90±1. 01)%,(12. 80±1. 70)%;沉默组分别为(2. 82±1. 01)%,(5. 13±2. 10)%,(7. 92±1. 90)%,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 Slit2/Robo1在宫颈癌组织中呈异常低表达,有利于抵抗细胞凋亡,在宫颈癌发生发展中发挥重要作用。

  • 单位
    福建医科大学附属第一医院

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