髓源性生长因子对肥胖小鼠白色脂肪棕色化的影响

作者：何凯悦; 徐晓丽; 石凌峰; 孙迎; 徐金玲; 童佳悦; 向光大^*

来源：中华糖尿病杂志, 2022, 14(04): 352-359.

DOI：10.3760/cma.j.cn115791-20211011-00545

• 小鼠, 肥胖
• 髓源性生长因子
• 白色脂肪组织
• 棕色脂肪组织

目的探讨髓源性生长因子(MYDGF)对肥胖小鼠白色脂肪棕色化的影响。方法高脂饲料喂养雄性C57BL/6J野生型(WT)小鼠和MYDGF基因敲除(KO)小鼠12周, 根据使用腺相关病毒(AAV)-MYDGF或AAV-绿色荧光蛋白(GFP)干预, 将WT和KO小鼠分为WT-GFP组、WT-MYDGF组、KO-GFP组和KO-MYDGF组, 普通饲料喂养的WT小鼠作为对照组。收集各组小鼠的体重、日间和夜间产热量, 解剖分离各组小鼠两侧附睾白色脂肪组织(eWAT)、腹股沟白色脂肪组织(iWAT)和肩胛棕色脂肪组织(iBAT)并称重, HE染色观察脂肪细胞形态, 免疫组化和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测皮下脂肪棕色化相关基因[解偶联蛋白1(UCP1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)、PR结构域蛋白16(PRDM16)]的表达, 免疫荧光检测皮下脂肪血管数量。根据噻唑蓝(MTT)实验结果, 选择使用100 ng/ml重组MYDGF(rMYDGF)干预24 h的3T3-L1细胞作为实验(rMYDGF)组, 未进行rMYDGF干预的细胞培养24 h作为对照(Vehicle)组, 采用RT-PCR和Western blot法检测两组细胞UCP1、PPARγ、PGC-1α、PRDM16的mRNA和蛋白的表达水平。采用独立样本t检验比较组间差异。结果共纳入30只小鼠, 对照组、WT-GFP组、WT-MYDGF组、KO-GFP组和KO-MYDGF组各6只。干预12周后, 与WT-GFP组和KO-GFP组相比, WT-MYDGF组与KO-MYDGF组小鼠体重均降低, 日间和夜间产热能力均提高, UCP1、PPARγ、PGC-1α、PRDM16的mRNA表达水平和血管数量均增高(P<0.05), 小鼠eWAT和iWAT的体积和细胞均减小;与WT-GFP组相比, WT-MYDGF组的eWAT和iWAT重量均减小(P<0.05);与KO-GFP组相比, KO-MYDGF组的eWAT重量减小(P<0.05)。体外培养3T3-L1脂肪细胞并使用重组MYDGF干预的结果显示, 与Vehicle组相比, rMYDGF干预组的棕色化相关基因UCP1、PPARγ、PGC-1α、PRDM16的mRNA和蛋白的表达水平均增高(P<0.05)。结论 MYDGF可促进肥胖小鼠白色脂肪棕色化。

• 单位
  南方医科大学; 第一临床医学院